酪氨酸激酶受体B及其配体脑源性神经营养因子水平对神经母细胞瘤耐药的影响

目的研究酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)及其配体脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达水平对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞化疗敏感性的影响。方法Western-blot技术检测不同纳摩尔浓度全反式维甲酸(all trans-retinoic acid, ATRA)诱导后TrkB蛋白水平变化;四甲基偶氮蓝比色(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测细胞凋亡率;透射电镜检测凋亡细胞的形态。结果(1)不同浓度ATRA(1、10、100 nmol／L)处理神经母细胞瘤细胞SY5Y 5 d,TrkB蛋白水平随ATRA浓度增加而增加;(2)BDNF 10 ng／ml+ATRA 10 nmol／L+顺铂(Cisplatin,CP)5μg／ml作用组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较均无显著差异,BDNF(50、100 ng/ml)加相同浓度ATRA及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,BDNF 100 ng／ml组存活率高于BDNF 50 ng／ml组,凋亡率低于BDNF 50 ng／ml组。ATRA 1 nmol／L+BDNF 50 ng／,ml+CP5μg/ml组细胞存活率、凋亡率同单用CP组比较无显著差异,ATRA 10、100 nmol／L加相同浓度BDNF及CP组细胞存活率均明显高于单用CP组,凋亡率均明显低于单用CP组,ATRA 100 nmol／L组细胞存活率高于ATRA 10 nmol／L组,凋亡率低于ATRA 10 nmol／L组。(3)透射电镜技术观察到CP作用组可见到较多细胞呈凋亡改变,而ATRA 10 nmol／L+BDNF 50 ng／ml+CP 5μg/ml组细胞形态多数正常。结论SY5Y对化疗药顺铂的敏感性受TrkB及BDNF水平的影响,二者水平越高越容易产生化疗耐药。