MGB-TaqMan探针实时荧光定量在快速检测产肠毒素大肠杆菌中的价值

被引：5

作者：

代娟 ^{[1
]}

李玉峰 ^{[2
]}

袁粒星 ^{[3
]}

杨潇 ^{[2
]}

机构：

[1] 成都医学院医学检验系

[2] 西华大学生物工程学院

[3] 四川大学华西医学院

来源：

中华预防医学杂志 | 2008年 / 02期

关键词：

大肠杆菌; 分子探针; 聚合酶链反应;

D O I：

暂无

中图分类号：

R686 [筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤];

学科分类号：

1002 ; 100210 ;

摘要：

目的采用 MGB-TaqMan 探针建立产耐热肠毒素大肠埃希菌实时荧光定量 PCR 检测方法。方法针对编码大肠埃希菌耐热肠毒素Ⅰ基因片段设计引物、MGB 探针,采用外标法,绘制标准曲线,进行实时荧光定量 PCR 检测。评价该方法的特异性,灵敏度,准确度,检测范围,重复性及稳定性等。做阴性对照,排除假阳性,采用 UNG 酶抗污染。结果实验结果表明引物、探针特异性良好,该方法的灵敏度可达到每反应3DNA 拷贝,特异性强,检测范围在10～0～10～9拷贝每反应,重复性及稳定性较好,整个过程只需要2 h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出产耐热肠毒素大肠埃希菌,对控制由耐热肠毒素引起的腹泻性疾病具有重要意义。

引用