环孢霉素A逆转人白血病耐药细胞系HL-60/ADM及其超微弱发光的观察

目的:探讨环孢霉素A(CSA)对抗阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM的耐药逆转作用,并比较二者之超微弱发光强度的特点。方法:选择环孢霉素A(CSA)作为耐药逆转剂,分别采用MTT法、流式细胞仪和免疫组化法分析CSA对人白血病耐药细胞系的毒性及逆转效果;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超微弱发光强度。结果:当CSA浓度在4ug/mL以下时,对HL-60/ADM无明显毒性作用,超过此浓度,其毒性呈剂量效应(P＜0．001)。当CSA浓度为0．5ug/mL时就有明显逆转作用,随着CSA剂量增加,逆转作用逐渐增强(P＜0．01),当CSA剂量达8ug/mL以上时对细胞存活产生明显的影响;流式细胞仪分析细胞周期可见逆转耐药细胞系HL-60/ADM+CSA较耐药细胞系HL-60/ADM的G2期细胞显著增多,而S期细胞明显减少(P＜0．01);免疫组化结果显示HL-60/ADM细胞膜上P-gp高表达,经CSA作用后其表达下降;在10-4mol/L鲁米诺及0．3%双氧水条件下HL-60/ADM细胞超微弱发光强度高于用CSA逆转后的细胞(P＜0．001)。结论:CSA能有效逆转HL-60/ADM的耐药性;逆转后细胞超微弱发光强度值的降低可能与其细胞增殖速度减慢,DNA复制减少,细胞内氧化代谢减弱以及自由基水平降低等因素有关。