p73基因过量表达对人肺癌细胞A549凋亡及其化疗敏感性的作用(英文)

被引:5
作者
何勇
范士志
蒋耀光
机构
[1] 第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心
关键词
p73基因; 肺肿瘤; A549细胞; 基因转移; 化疗敏感性; 凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R734.2 [肺肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
背景与目的:部分非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)表达野生型p53基因(wild-typep53,wt-p53),因此在基因治疗中克服这些NSCLC对wt-p53的抵抗机制就非常重要。P53基因家族的新成员p73是p53的同源体,本研究旨在探讨对wt-p53基因治疗抵抗的人肺腺癌细胞A549在外源p73基因转染或联用化疗药后凋亡程度和对化疗药物敏感性的变化。方法:将真核表达重组质粒pcDNA3-HA-p53或pcDNA3-HA-p73α转染入A549细胞,G418筛选,Westernblot检测P53或P73α的表达。MTT法分析转染细胞对顺铂和阿霉素的敏感性,用流式细胞术、TUNEL法和DNA片段法分析化疗药作用下转染细胞的凋亡变化,克隆形成实验观察细胞生物学性状的改变。结果:转染p53或p73α基因的A549细胞可以稳定高表达p53或p73α蛋白。转染p73α的A549细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(6.25μmol/L的顺铂或0.25μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制,顺铂的IC50值从22.65μmol/L降至3.75μmol/L,阿霉素的IC50值从4.20μmol/L降至0.06μmol/L。p73能使A549细胞受顺铂和阿霉素诱导的细胞凋亡增加,而p53没有明显作用。流式细胞术显示p73α基因转染后,顺铂诱导的细胞凋亡率从10.6%升高到36.8%(P<0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从13.0%升高到41.1%(P<0.01)。克隆形成实验显示,p73α基因转染能明显降低顺铂和阿霉素作用后A549细胞的克隆形成数(P<0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为2.0和2.4倍。结论:外源性p73基因的导入增加了wt-p53型A549细胞对顺铂和阿霉素等化疗药的敏感性,该作用可能与p73基因能不依赖于p53基因诱导细胞凋亡有关。p73基因可用于治疗wt-p53不能发挥作用的恶性肿瘤。
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共 1 条
[1]   p53 Gene status in relation to ex vivo chemosensitivity of non-small cell lung cancer [J].
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