两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致ICR小鼠腹泻的毒力比较

被引:4
作者
庞伟
黄永坤
孟明耀
王萍
刘建生
徐冬蕾
戚勤
侯宗柳
机构
[1] 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所
[2] 昆明医学院第一附属医院
[3] 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所 昆明市
[4] 昆明市
关键词
轮状病毒; NSP4蛋白; 腹泻;
D O I
暂无
中图分类号
R373 [人体病毒学(致病病毒)];
学科分类号
100123 [人体微生态学];
摘要
目的研究两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白139位氨基酸位点的变异对毒力的影响。方法从2002~2004年昆明地区婴幼儿轮状病毒感染者大便样品中,通过RT-PCR,PCR扩增了22株轮状病毒株的NSP4全长基因、cDNA序列,并对cDNA序列测序,发现这些病毒株的NSP4氨基酸序列高度保守,仅在79位、139位氨基酸位点存在差异。选取139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株,在E.coli BL21中,用pGEX5X-1载体融合表达了两株病毒的86~175位氨基酸(GST-NSP486-175;并酶切融合头得到两种NSP486-175蛋白,在ICR乳鼠中比较这4种不同蛋白致小鼠腹泻的差异。结果发现GST-NSP486-175蛋白毒性比NSP486-175蛋白强,而139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株的NSP486-175蛋白毒性没有明显的差异。结论139位氨基酸位点的变异并不影响NSP4蛋白的毒力改变。
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共 2 条
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