农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究

被引：12

作者：

翁琴 ^{[1
]}

陈全家 ^{[1
]}

孔庆平 ^{[2
]}

张国政 ^{[1
]}

武金玲 ^{[1
]}

曲延英 ^{[1
]}

机构：

[1] 新疆农业大学农学院

[2] 新疆农科院经济作物研究所

来源：

新疆农业大学学报 | 2007年 / 04期

关键词：

海岛棉茎尖; 遗传转化; 根癌农杆菌; BT基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

S562 [棉];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

采用根癌农杆菌LBA4404和EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究。茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6～0.8农杆菌菌液中感染20～30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50～150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应。由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中。

引用

页码：63 / 67

页数：5

共 11 条

[1] 基因枪转化技术在棉花遗传转化上的应用 [J].