流式细胞术检测胱氡肽酶3原位激活与两种检测细胞凋亡方法的比较性研究

被引：5

作者：

冯永东

陶德定

谢大兴

钟以胜

李小兰

肖薇

余源

吴剑宏

胡俊波

龚建平

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院肿瘤研究所分子医学中心

[2] 华中科技大学同济医学院肿瘤研究所分子医学中心武汉

[3] 武汉

来源：

中华检验医学杂志 | 2004年 / 09期

关键词：

细胞凋亡; 流式细胞术; 胱氡肽酶3;

D O I：

暂无

中图分类号：

R361 [病理解剖学与组织学];

学科分类号：

100104 ;

摘要：

目的　用一种新的荧光染色技术 (FLICA/PI)检测放射诱导T淋巴细胞白血病细胞(MOLT 4 )的细胞凋亡过程中胱氡肽酶 3(Caspase 3)原位激活及探讨其活性变化特点 ,并与亚G1峰和膜联蛋白V/碘化丙啶 (AnnexinV/PI)检测细胞凋亡方法的灵敏度进行比较性评价。方法　以放射诱导的MOLT 4细胞凋亡为模型 ,用荧光标记的Caspase 3抑制剂 (FLICA)标记原位激活的Caspase 3,然后 ,用流式细胞仪定量检测并分析其活性变化 ;同时 ,用亚G1峰法和AnnexinV/PI检测细胞凋亡。结果　FLICA/PI检测到的Caspase 3激活 ,在照射后 2h开始升高 (5 84 % ) ,而AnnexinV/PI在 4h时检测到的凋亡率为 5 35 % ,FLICA/PI比AnnexinV/PI可提前 2h检测到细胞凋亡 ,Caspase 3活性的出现早于细胞膜反转。FLICA阳性率在照射后 4h暴发性增高至 12 39% ,显示有时间效应。两种检测方法均比亚G1峰法敏感 ,但AnnexinV/PI检测的凋亡率低于FLICA/PI法。结论　X 射线能诱导MOLT 4细胞凋亡 ,并有明显的时间效应关系 ;Caspase 3激活有阈值效应 ,是照射后细胞发生凋亡过程中早于形态学变化的检测指标。用Caspase 3活性检测细胞凋亡更直接 ,更敏感。

引用

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页数：4

共 9 条

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