核转录因子在肿瘤坏死因子-α所致内皮细胞凋亡中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是否通过信号传导系统－核转录因子（NF-kB）的激活，导致诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达增加，引起内皮细胞凋亡。方法体外培养牛肺动脉内皮细胞，观察iNOS抑制剂一氨基胍，以及NF－kB抑制剂－吡咯烷二硫氨基甲酸盐（PDTC）对TNF-α所致内皮细胞凋亡的影响，观察细胞形态学变化、用DNA电泳及DNA断裂百分率确定细胞凋亡情况；Westernblot分析内皮细胞经TNF-α损伤后iNOS合成及I-kBα的变化；凝胶滞留法检测NF-kB活性。结果TNF-α以剂量和时间依赖性地引起内皮细胞凋亡，TNF-α2500U／ml处理24小时后DNA断裂百分率为（18．0±4．3）％。而氨基胍及PDTC可明显抑制TNF-α所致的内皮细胞凋亡，2、4、10mmol／L氨基胍所致内皮细胞DNA断裂百分率分别为（10．0±2．2）％、（7．8±1．2）％、（8．2±1．3）％。内皮细胞经TNF-α损伤后，I-kBα下降而iNOS合成增加，NF-kB活性增强。结论TNF-α所致内皮细胞凋亡与I-kBα降解，NF-kB活化，导致了iNOS表达增加，与大量一氧化氮释放有关。