TORCH与优生：Ⅲ用聚合酶链反应结合地高辛分子杂交产前诊断弓形虫感染

根据本实验室筛选出的弓形虫（ＺＳ２株）特异ＤＮＡ克隆片段的部分顺序分析的数据，设计并合成特异的寡核苷酸引物对，建立多聚酶链反应（ＰＣＲ）诊断弓形虫感染的方法。不同来源弓形虫株和阳性标本ＤＮＡ的ＰＣＲ产物经电泳检测，均出现特异的扩增片段。以地高辛标记的该ＰＣＲ产物中弓形虫特异顺序的寡核苷酸为探针，对扩增产物进行斑点杂交分析，该探针能与阳性病例的扩增产物杂交，而不与阴性病例的扩增产物杂交。用ＰＣＲ结合地高辛分子杂交方法对不良生育史孕妇进行产前诊断，３４例外周血白细胞ＤＮＡ检测，２例阳性，分别为出生水肿胎儿和死胎；７６例羊水细胞ＤＮＡ检测，３例阳性，其中２例出生为无脑儿；３０例绒毛ＤＮＡ检测，４例阳性，均为难免流产。ＰＣＲ产物结合地高辛分子杂交方法可测出少至１０ｆｇ（１０－１４ｇ）的弓形虫ＤＮＡ，本方法更加特异敏感。