油菜花药离体培养研究

以湘油 1 3号 ,湘油 1 4号 ,945 91 ,373和 ZB等 5个油菜品种离体花药为材料 ,接种花粉处单核靠边期的花药 ,经过愈伤组织诱导、增殖和分化培养 ,成功地获得了 945 91 ,湘油 1 4号和 373等 3个品种花粉愈伤组织再生植株 ,分化率分别为 1 6 .7% ,1 2 .5 %和 7.9% ,而湘油 1 3号获得了花粉愈伤组织 ,但没有获得不定芽分化 .不同基因型油菜花药愈伤组织诱导率有明显差异 .诱导率由高到低依次为 :湘油 1 4号 (46 .5 % ) ,湘油 1 3号 (1 9.5 % ) ,373(1 0 % ) ,945 91 (8.5 8% ) ,ZB(0 ) .油菜花药培养诱导愈伤组织通常均要求 2 ,4- D和 BA结合使用 ,并要求 2 ,4- D质量浓度高于 BA的质量浓度 .花药涂片镜检结果表明 ,愈伤组织来源于花药中的花粉细胞 .不同培养基的分化效果差异显著 ,愈伤组织培养在添加 BA后再分别加入低质量浓度的 2 ,4- D,IAA,GA3的 3种培养基上有不定芽分化 ,其中 BA+GA3的培养基上分化的不定芽大多呈玻璃化 ,经转移到只含 BA的培养基上可直接从玻璃化芽上形成正常的不定芽 .培养基中添加大蒜素溶液可减轻油菜花药愈伤组织的褐化 ,降低玻璃化苗的分化频率