人表皮蛋白质组双向电泳的建立及技术的改进

被引：1

作者：

龙亭 ^{[1
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黄欣 ^{[2
]}

高永良 ^{[1
]}

陈爱军 ^{[1
]}

李文静 ^{[1
]}

机构：

[1] 重庆医科大学附属第一医院皮肤科

[2] 重庆医科大学中医药学院中药方剂教研室

来源：

中国生物制品学杂志 | 2010年 / 23卷 / 10期

关键词：

表皮; 双向电泳; 蛋白质组学;

D O I：

10.13200/j.cjb.2010.10.100.longt.013

中图分类号：

Q503 [生物化学技术];

学科分类号：

070307 [化学生物学];

摘要：

目的建立人表皮蛋白质组双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱,并改进技术条件,为人表皮蛋白质组学的研究提供技术参考。方法以2种不同的方法提取人表皮总蛋白,使用固相pH梯度胶条进行2-DE,并对样品上样量、等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF)参数及硝酸银染色等关键步骤进行改进,采用PDQuest8.0软件分析比较2-DE图谱。结果采用液氮研磨后再裂解的方法制备的人表皮总蛋白,以250μg上样,以改进的IEF参数和硝酸银染色步骤获得的2-DE图谱清晰、分辨率高、重复性好,匹配率为85.5%。分离出蛋白质点551±31个,均匀分布在相对分子质量14000～100000、pH5～8之间,比常规方法所获得的2-DE图谱蛋白点明显增多(P<0.05)。结论已建立了人表皮蛋白质组2-DE图谱,改进的方法比常规方法更适用于人表皮蛋白质组学的研究。

引用

页码：1129 / 1131+1137 +1137

页数：4

共 8 条

[1]

人表皮组织蛋白质组双向电泳技术的建立 [J].