Aβ对SH-SY5Y细胞Bcl-2、Bax基因启动子区DNA甲基化的影响

被引：6

作者：

郭敏 ^{[1
,2
]}

张宪武 ^{[3
]}

马天宇 ^{[1
]}

张宏 ^{[1
]}

苏苗 ^{[1
]}

武燕 ^{[1
]}

李刚 ^{[1
]}

机构：

[1] 内蒙古医科大学药学院

[2] 鄂尔多斯市中心医院药剂科

[3] 内蒙古精神卫生中心

来源：

中国药理学通报 | 2016年 / 08期

关键词：

SH-SY5Y细胞; amyloid-β; 凋亡; DNA甲基化; DNA甲基化酶; Bcl-2; Bax;

D O I：

暂无

中图分类号：

R749.16 [];

学科分类号：

摘要：

目的探讨Aβ25-35介导SH-SY5Y细胞Bcl-2、Bax基因表达改变是否通过基因启动子区甲基化的机制。方法不同浓度Aβ25-35(0、25、50μmol·L-1)分别作用于体外培养的SH-SY5Y细胞48、72 h,MTT法确定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的最佳浓度和时间。Western blot检测不同药物处理组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达变化,Real time PCR检测DNA甲基化酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、Me CP2的mRNA水平。Methylation specific PCR（MSP）法分析Aβ25-35介导的Bcl-2、Bax基因启动子区甲基化水平的变化。结果 25μmol·L-1Aβ25-35暴露SH-SY5Y细胞72 h后,MTT检测细胞存活率达（68.49±9.83）%,与对照组比较明显降低（P<0.05）,表明成功建立了AD细胞凋亡模型。Western blot结果显示,Aβ25-35药物处理组与空白组比较,Bcl-2表达明显减少,Bax表达明显增加。Real-time PCR结果显示,不同浓度的Aβ25-35药物组与空白组比较,DNA甲基化酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MeC P2表达无变化（P<0.05）;MSP结果显示空白对照组Bcl-2和Bax甲基化扩增阴性,非甲基化扩增阳性;Aβ25-35处理组Bcl-2和Bax甲基化引物扩增阴性,非甲基化引物扩增阳性。结论 MSP结果显示Aβ25-35介导SHSY5Y细胞凋亡未引起Bcl-2、Bax启动子区甲基化的改变。

引用

页码：1158 / 1164

页数：7

共 9 条

[1]

去甲基化机制在腺苷及同型半胱氨酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡中的作用 [J].

项梦琦 ;

刘丽璇 ;

邓巍 ;

周小涛 ;

陈沛锐 ;

郭益添 ;

叶艳清 ;

蒲泽锦 ;

吴灵飞 .

中国药理学通报, 2014, (07) :973-979

[2]

阿尔兹海默病中DNA甲基化对β-淀粉样蛋白的影响[J] 邓钰双;余刚; 遗传 2014, 04

[3]

Bcl-2基因启动子区异常甲基化在慢性阻塞性肺疾病肺血管内皮细胞凋亡中的作用 [D].

曾慧卉 .

中南大学,

2012

[4]

Pharmacologic inhibition of epigenetic modification reveals targets of aberrant promoter methylation in ewing sarcoma[J] Shawnagay Nestheide;Julia A. Bridge;Michael Barnes;Robert Frayer;Janos Sumegi Pediatr Blood Cancer 2013,

[5]

Amyloid-β Alters the DNA Methylation Status of Cell-fate Genes in an Alzheimer's Disease Model[J] Noor Taher;Courtney McKenzie;Rebecca Garrett;Matthew Baker;Nena Fox;Gary D. Isaacs Journal of Alzheimer's Disease 2013,

[6]

Impact of MTHFR gene C677T polymorphism on Bcl-2 gene methylation and protein expression in colorectal cancer[J] Qinghui Zhu;Zhonggan Jin;Ya Yuan;Qing Lu;Danhong Ge;Ming Zong Scandinavian Journal of Gastroenterology 2011,

[7]

In the cerebral cortex of female and male mice; amyloid precursor protein (APP) promoter methylation is higher in females and differentially regulated by sex steroids[J] S.T. Mani;M.K. Thakur Brain Research 2005,

[8]

Etiology of sporadic Alzheimer’s disease: Somatostatin; neprilysin; and amyloid β peptide[J] E. Hama;T.C. Saido Medical Hypotheses 2005,

[9]

Biochemistry and biology of mammalian DNA methyltransferases[J] A. Hermann;H. Gowher;A. Jeltsch Cellular and Molecular Life Sciences 2004,

← 1 →