家蚕后部丝腺线粒体DNA的制备

被引:15
作者
曹阳
唐任天
刘良式
唐维六
机构
[1] 西南农学院生物学基础部
[2] 中国科学院微生物研究所
[3] 中国科学院遗传研究所
[4] 华南农业大学蚕桑系
关键词
mtDNA; 线粒体; 粒线体; DNA; 后部丝腺; 家蚕; 桑蚕;
D O I
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摘要
本文首次报道了制备家蚕,五龄初期幼虫后部丝腺线粒体DNA的结果。后丝腺匀浆后,以600g和15,000g差速离心,得到完整离体线粒体。在高渗条件下,以牛胰 DNase Ⅱ处理污染的核DNA。碱性SDS裂解线粒体后,经RNase处理,并通过Sepharose 2B凝胶柱分部,便得到可供电镜分析与限制性内切酶消化的线粒体DNA制品。初步结果表明,家蚕后丝腺mtDNA为环状分子。分子量较大,约为11×10~6d的2倍、3倍和4倍。每条丝腺约含0.5微克。每个线粒体约含3×10-3微克,大概有2—4个拷贝。
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