茶树咖啡因合成酶基因RNA干涉表达载体构建

被引：20

作者：

张广辉

梁月荣

陆建良

董俊杰

机构：

[1] 浙江大学茶学系

来源：

茶叶科学 | 2006年 / 04期

关键词：

茶树; 咖啡因合成酶基因; RNA干涉; PCR;

D O I：

10.13305/j.cnki.jts.2006.04.002

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程]; S571.1 [茶];

学科分类号：

071007 ; 090102 ; 0902 ; 090203 ;

摘要：

咖啡因合成酶(TCS)是茶树咖啡因生物合成途径中的一个关键酶,催化7-甲基黄嘌呤转变为可可碱和可可碱转变为咖啡因。抑制TCS基因表达是培育低咖啡因茶树的最有效途径。用RT-PCR方法扩增茶树TCS基因的两个cDNA片段,并克隆入T-载体中。干涉载体和TCS基因片段的T克隆经限制性内切酶两次双酶切与连接,将两个TCS基因片段分别反向重复插入到干涉载体pFGC5941,构建了TCS基因的RNA干涉载体,分别命名为pFGC5941-TCS02和pFGC5941-TCS03。经PCR和DNA测序获得验证。TCS基因RNA干涉载体的构建为培育低咖啡因茶树奠定了基础。

引用

页码：243 / 248

页数：6

共 5 条

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