共价固定亲和素的磁性纳米粒子用于快速测定蛋白A含量

被引:2
作者
孙术国 [1 ,2 ]
马美湖 [1 ]
覃芳 [1 ]
徐娅茹 [1 ]
余文珍 [1 ]
罗章 [1 ]
机构
[1] 华中农业大学食品科学技术学院国家蛋品加工技术研发分中心
[2] 吉首大学化学化工学院
关键词
磁性纳米粒子; 亲和素; 共价固定; 活性评价;
D O I
暂无
中图分类号
O629.73 [蛋白质];
学科分类号
070303 [有机化学];
摘要
采用溶剂热法制备了Fe3O4磁性纳米粒子(MNPs),以戊二醛为交联剂,将亲和素共价固定于MNPs表面.用透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和荧光光谱等手段对蛋白固定过程进行了监控和表征.采用荧光光谱法评价了固定亲和素的磁性纳米粒子(Avi-MNPs)的活性,并将Avi-MNPs应用于分光光度法测定蛋白A的含量.TEM结果表明,功能化前后MNPs的粒度分布均匀,粒径大小分别约为30和50 nm.XRD分析结果表明,MNPs与Fe3O4的特征衍射峰完全一致,晶体纯度良好.UV-Vis,FTIR和荧光光谱结果表明,亲和素已固定在MNPs表面.Avi-MNPs活性评价结果表明,其结合生物素的活力为4.706 U/mg Avi-MNPs,低于游离的亲和素活力(14.1 U/mgD-biotin).该方法用于检测蛋白A含量比传统酶联免疫法省时、省力,且对检测仪器要求低.
引用
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页码:1426 / 1431
页数:6
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