嗜肺军团菌荧光定量PCR检测

被引：16

作者：

朱水荣 ^{[1
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张政 ^{[1
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卢亦愚 ^{[1
]}

任红宇 ^{[2
]}

扬仕贵 ^{[1
]}

高晓萍 ^{[1
]}

机构：

[1] 浙江省疾病预防控制中心微生物所

[2] 中国疾病预防控制中心

来源：

中国公共卫生 | 2008年 / 09期

关键词：

嗜肺军团菌; mip基因; TaqMan探针; 荧光定量PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

100215 ;

摘要：

目的建立特异、快速、敏感的TaqMan探针荧光定量PCR方法,用于检测嗜肺军团菌mip基因。方法嗜肺军团菌及其他军团菌DNA模板来自中国疾病预防控制中心呼吸道室,嗜肺军团菌地方株及其他对照株由本中心菌种室供给。利用嗜肺军团菌mip基因保守序列设计引物和TaqMan探针,对其进行筛选,同时对荧光定量PCR反应条件和反应体系进行优化,并对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他细菌进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性等。结果该方法在检测多株嗜肺军团菌时,均出现阳性信号,而对非嗜肺军团菌和其他细菌则未有阳性扩增结果出现。检测灵敏度达10个拷贝/反应,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2 h左右,可减少常规PCR操作的污染机会。结论TaqMan荧光定量PCR方法可定量检测嗜肺军团菌,具有特异性高、快速、敏感等特点,适于外环境污染源状况的调查及应急事件的快速定量检测。

引用

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