洋葱(Alliumcepa L.)RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化

被引：6

作者：

陈沁滨 ^{[1
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侯喜林 ^{[1
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王建军 ^{[1
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冷月强 ^{[1
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蒋芳玲 ^{[1
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薛萍 ^{[2
]}

机构：

[1] 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

[2] 连云港市农业科学院

来源：

江苏农业学报 | 2006年 / 04期

关键词：

洋葱; RAPD-PCR反应体系; 扩增程序; 正交设计;

D O I：

暂无

中图分类号：

S633.2 [洋葱（葱头）];

学科分类号：

摘要：

为建立多态性高、稳定性好的洋葱RAPD-PCR反应体系,采用正交设计,研究了Taq酶、Mg2+、引物和dNTP 4种RAPD-PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,在此基础上对模板DNA用量、扩增程序中退火温度和反应循环次数进行了筛选。试验结果表明,洋葱20μl RAPD-PCR优化反应体系为1×Buffer、2.0 mmo1/L Mg2+、1.0 UTaqDNA聚合酶、200μmo1/L dNTP、0.6μmo1/L引物、2%甘油和15 ng DNA模板;PCR扩增程序为94℃预变性4 m in;94℃变性30 s,35℃退火40 s,72℃延长1.5 m in,45个循环;72℃保温延伸7 m in。

引用

页码：434 / 438

页数：5

共 15 条

[1] 兰属品种的RAPD鉴定和亲缘关系分析 [J].