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端粒重复扩增-微孔板杂交法用于端粒酶活性测定的研究
被引：20
作者：
王惠民
施健
刘俊华
瞿晓慈
张冬雷
杨振华
机构：
[1] 南通医学院附属医院
来源：
关键词：
端粒酶,端粒,TRAP-微孔板杂交,肿瘤;
D O I：
暂无
中图分类号：
R730.43 [实验室诊断];
学科分类号：
摘要：
目的探讨用端粒重复扩增（ＴＲＡＰ） 微孔板杂交法，检测人端粒酶方法学研究及临床应用。方法利用Ｋｉｍ法处理组织与胸腹水细胞及扩增端粒酶产物，引物ＴＳ含生物素，扩增产物与包被有亲和素的微孔板结合，并与含荧光素特异探针杂交，酶标记抗荧光素抗体与之结合而呈色。结果该方法ＮａＯＨ的最佳变性浓度为０６ｍｏｌ／Ｌ，最佳杂交时间为１小时，批内变异系数（ＣＶ）为９６％。在９４例各种恶性肿瘤组织与恶性胸腹水端粒酶活性总检出率８９４％，其中５例胸腹膜转移癌的胸腹水检出率为８０％，５８例肿瘤远端组织与良性胸腹水为８６％。结论该法有较好的测定敏感度与重复性，较银染色法更为简便快速，无同位素污染，检测成本低，值得临床推广
引用
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