HPLC法同时测定黄连双清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素的含量

目的:建立同时测定黄连双清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素含量的HPLC法。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),采用梯度洗脱(0～5 min,12%A;5～10 min,12%A→20%A;10～20 min,20%A→25%A;20～25 min,25%A→30%A;25～30 min,30%A→65%A;30～35min,65%A→90%A),流速为1.0 mL·min-1,柱温为室温,检测波长分别为240 nm(栀子苷、芍药苷),275 nm(黄芩苷、盐酸小檗碱、大黄素)。结果:栀子苷、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素进样量分别在0.08～0.4μg(r=0.9998)、0.128～0.768μg(r=0.9996)、0.128～0.896μg(r=0.9996)、0.10～0.554μg(r=0.9997)和0.08～0.48μg(r=0.9996)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=6)分别为101.3%、98.5%、100.2%、97.4%和95.9%,RSD分别为2.8%、1.7%、2.2%、1.3%和1.9%。结论:本法适用于同时测定黄连双清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素的含量。