人NaDC1基因近端启动子生物信息学分析及载体构建

被引：5

作者：

杨聚荣 ^{[1
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张剑凯 ^{[2
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何娅妮 ^{[1
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李新伦 ^{[1
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梁海君 ^{[1
]}

林静 ^{[1
]}

机构：

[1] 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科

[2] 广东医学院基础学院解剖学教研室

来源：

第三军医大学学报 | 2007年 / 14期

关键词：

hNaDC1基因; 转录调控; 报告基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的对人NaDC1(hNaDC1)基因近端启动子进行生物信息学分析,预测可能的调控区域及顺式元件,并构建相应基因序列萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。方法使用First EF程序分析并获得hNaDC1基因近端启动子序列,使用MatInspector5.0软件对近端启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。PCR法扩增hNaDC1基因近端启动子序列,PCR产物经KpnⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆到pGL3-Basic载体。重组质粒行KpnⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定。结果使用FirstEF程序获得长度为2.4kb(-2232/+136)的hNaDC1基因近端启动子序列。MatInspector5.0程序分析显示该基因序列共含有152个74种顺式作用元件。KpnⅠ和HindⅢ双酶切及测序鉴定证实构建的pGL3-hNaDC1A质粒插入片段正确无误。结论成功构建hNaDC1基因近端启动子转录调控序列萤火虫荧光素酶报告基因表达载体,为利用双荧光素酶报告基因检测系统研究hNaDC1基因近端启动子转录调控元件的分布及其性质提供了基本试验条件。

引用

页码：1410 / 1412

页数：3

共 4 条

[1]

Molecular properties of the SLC13 family of dicarboxylate and sulfate transporters [J].

Pajor, AM .

PFLUGERS ARCHIV-EUROPEAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY, 2006, 451 (05) :597-605

[2]

The SLC13 gene family of sodium sulphate/carboxylate cotransporters.[J].Daniel Markovich;Heini Murer.Pflügers Archiv - European Journal of Physiology.2004, 5

[3]

两种端粒酶逆转录酶启动子真核表达载体的构建 [J].