油桐桐酸合成酶基因克隆和植物表达载体构建

被引:8
作者
汪阳东
李元
李鹏
机构
[1] 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
关键词
油桐; FADX基因; 克隆; 载体构建;
D O I
暂无
中图分类号
S794.3 [油桐]; Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
0829 ; 0907 ; 071007 ; 090102 ;
摘要
α-桐酸合成酶是控制亚油酸向α-桐酸(18:3Δ9cis,11trans,13trans)转化的关键酶。本研究以发育中的油桐种子为材料,利用改良TRIzoL法提取总RNA,并根据GenBank中已经登录的α-桐酸合成酶基因FADX的序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法,克隆得到FADX基因全长cDNA,长度为1221bp。通过生物信息学分析结果表明,该序列5’端和3’端非编码区序列长度分别为13bp和47bp,含有一个开放阅读框(14~1174bp),编码386个氨基酸,含有典型的脂肪酸脱氢酶结构域。将所得基因经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121,构建反义表达载体pBI121fadx。
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