猪圆环病毒2型猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒三重PCR检测方法的建立

被引：18

作者：

方立 ^{[1
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徐辉 ^{[2
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陈伟杰 ^{[2
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赵灵燕 ^{[2
]}

倪柏锋 ^{[2
]}

方维焕 ^{[1
]}

机构：

[1] 浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室

[2] 浙江省畜牧兽医局

来源：

中国兽医科技 | 2005年 / 12期

关键词：

猪圆环病毒2型; 猪伪狂犬病病毒; 猪细小病毒; 三重PCR;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2005.12.007

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学]; S854.4 [兽医诊断学];

学科分类号：

090601 ; 0906 ;

摘要：

针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2、猪伪狂犬病病毒(PRV)gD和猪细小病毒(PPV)VP2基因保守区域,设计了特异性引物,在分别建立单一病毒基因PCR检测方法的基础上,通过对3组引物的比例和浓度、dNTPs和Mg2+浓度、退火温度等条件的优化,建立了针对上述3种病毒的三重PCR检测方法。敏感性试验表明,应用该方法最低可检测到4×10-4ng/μL的PRV双链DNA模板和2×10-5ng/μL的PCV2和PPV单链DNA模板。对21份自然感染病猪样品的检测结果表明,该三重PCR检测结果与单一PCR检测的结果完全符合。试验结果显示,建立的三重PCR方法可用于3种DNA病毒的同时检测,具有快速、准确的特点,有临床应用前景。

引用

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