胸膜肺炎放线杆菌apxⅡCA基因的克隆、表达及ApxⅡ-ELISA检测方法的初步建立附视频

被引：9

作者：

徐晓娟

何启盖

徐高原

陈焕春

机构：

[1] 华中农业大学动物医学院

[2] 华中农业大学动物医学院湖北武汉

[3] 湖北武汉

来源：

中国兽医学报 | 2004年 / 04期

关键词：

胸膜肺炎放线杆菌; apxⅡCA基因; 克隆; 表达; ELISA;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2004.04.008

中图分类号：

S852.619 [];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连接到原核表达载体 p ET- 17b,构建了原核表达质粒 p ET- apx CA,并在大肠杆菌 BL 2 1(DE3)中表达出了大小约 10 5 0 0 0的 Apx 蛋白。提取包涵体蛋白作为抗原包被 EL ISA酶标板 ,对已知阳性、阴性血清和临床送检血清样品进行了 EL ISA检测 ,从而为最终建立 Apx - EL ISA检测方法奠定了基础

引用

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共 3 条

[1] 胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ C突变株转移载体pSKPG的构建 [J].