灵芝原生质体分离与再生研究

被引:40
作者
李刚
李宝健
机构
[1] 中山大学生物工程研究中心!广州,
基金
广东省自然科学基金;
关键词
灵芝; 原生质体; 分离; 再生;
D O I
10.13346/j.mycosystema.1999.01.014
中图分类号
Q932 [微生物细胞学];
学科分类号
071009 ;
摘要
首次详细、系统地探讨了灵芝原生质体分离与再生的条件,结果表明:用0.6mol/L甘露醇配制成含2%溶壁酶和0.5%崩溃酶的复合酶,在30℃,pH为6.0时酶解3小时,可得到最高的原生质体得率。但考虑到原生质体的再生,以酶解2.5小时为最适。酶解2.5小时所得原生质体经精制,用纤维二糖培养基(以0.6mol/L甘露醇为渗透压稳定剂)进行双层平板(上层平板含0.2%琼脂)培养法再生,原生质体的再生率最高。本研究为以后进行灵芝原生质体的融合以及灵芝的转基因研究打下了基础。
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