对深海适冷菌Pseudomonas sp.SM9915分泌不同适冷蛋白酶的研究

从 1 8 5 5m深的海底泥样中分离到一株产适冷蛋白酶的适冷菌Pseudomonassp .SM991 5 ,经测定发现该菌株的最适生长温度为 2 0℃ ,最适产酶温度为 1 5℃ ,粗蛋白酶的最适酶活温度为 40℃。在此基础上 ,采用硫酸铵沉淀和分子筛层析方法对P .sp.SM991 5分泌的蛋白酶进行了分离纯化。结果表明 ,P .sp .SM991 5至少分泌三种适冷蛋白酶 ,并且三种蛋白酶的性质有所不同。这三种蛋白酶的最适pH分别为 8.0、9.0、7.0。最适酶活温度分别为45℃、40℃、40℃ ;其热稳定性也有明显的差别 ,40℃下保温 ,酶活的半衰期分别为 1 1min、5min和 2 7min ,表明这三种蛋白酶对低温的适应进化是不同步的。