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茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化
被引:16
作者:
吴姗
梁月荣
陆建良
金惠淑
吴颖
机构:
[1] 浙江大学茶叶研究所
来源:
关键词:
茶学;
茶树;
转化;
农杆菌;
基因枪;
D O I:
10.13305/j.cnki.jts.2003.01.002
中图分类号:
S571.1 [茶];
学科分类号:
0902 ;
090203 ;
摘要:
在用农杆菌浸染前,将茶树外植体预培养在含有PVP(polyvinylpyrrolidone,16g/L)的预培养基上2-3d可提高转化频率。优化后的茶树基因枪转化体系,即制弹程序:60 mg/1ml钨粉悬浮液10 l中加入1.6 l质粒DNA(1 g/l),再分别加入0.1 mol/L的亚精胺4 l,2.5 mol/L 的CaCl2 15 l,最后定容至48 l;每次轰击上样量为8-10 l。基因枪转化后抗性筛选2个月,抗性愈伤组织存活率为5.0%12.1%。
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