白细胞介素-1受体拮抗蛋白间接体内转基因对骨关节炎软骨细胞凋亡的抑制作用

目的通过白细胞介素-1受体拮抗蛋白（IL-1Ra）间接体内转基因治疗试验性兔骨关节炎,探讨IL-1Ra对兔膝关节软骨细胞凋亡的抑制作用。方法①30只新西兰大白兔随机分成3组,左膝关节部分滑膜切除,分离并培养滑膜成纤维细胞。②用携带标记基因或IL-1Ra基因的逆转录病毒分别转染从第2组或第3组兔膝关节分离出来的滑膜细胞。③兔右膝关节前交叉韧带横断术（ACLT）建立骨关节炎模型。④把自体滑膜细胞回输第1组兔右膝关节腔内,再把转染标记基因或IL-1Ra基因的自体滑膜细胞回输第2组或第3组兔右膝关节腔内。⑤2、4周后,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测关节液中IL-1Ra水平。⑥TUNEL末端荧光标记法测关节软骨细胞凋亡发生率。结果第3组兔膝关节液中IL-1Ra水平,在基因转入关节腔后第2周时为（20.6±1.8）ng/ml,第4周时为（4.82±0.52）ng/ml;而2、4周时,第1、2组中IL-1Ra水平均极低。第3组软骨细胞凋亡被抑制,仅有18%发生细胞凋亡,而在第2组关节软骨细胞近40%发生细胞凋亡,正常对照组中只有2%5%的软骨细胞发生凋亡。结论本试验证明关节腔内注入体外转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞,即IL-1Ra间接体内转基因治疗,能使关节腔局部IL-1Ra水平明显升高,使关节软骨细胞凋亡受到抑制。