利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒

被引：16

作者：

胡勤学

林木兰

张春立

吴德喜

陈捷

机构：

[1] 中国科学院武汉病毒研究所

[2] 湖南省园艺研究所

[3] 武汉同济医科大学协和医院血液研究所武汉

[4] 武汉

[5] 长沙

来源：

ActaBotanicaSinica | 1997年 / 07期

关键词：

柑桔裂皮病类病毒; 反转录PCR; DIG标记cDNA探针;

D O I：

暂无

中图分类号：

S436.66 [柑桔类病虫害];

学科分类号：

090401 ; 090402 ;

摘要：

参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别能从感病香橼和柑桔总核酸中扩增出210bp和370bp左右的特异DNA,分别相当于CEVd的左半部和全长片段,T1/T2未能扩增出产物;健康香橼和柑桔总核酸中均未能扩增出产物。扩增结果用DIG标记的CEVd-cDNA探针进行了确证。扩增结果说明:CEVd中国分离物在左端T区与CEVd-A株存在差异。PAGE-银染法分析扩增产物表明:建立的RT-PCR方法可从约0.1ng柑桔总核酸中扩增出全长CEVd-cDNA。

引用

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