海南木莲基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化

被引：14

作者：

魏小玲

曹福祥

陈建

机构：

[1] 中南林业科技大学

来源：

中南林业科技大学学报 | 2010年 / 30卷 / 05期

关键词：

分子生物学; 海南木莲; 预先去杂CTAB法; 单因素实验; ISSR—PCR; 反应体系;

D O I：

10.14067/j.cnki.1673-923x.2010.05.029

中图分类号：

S792.99 [其他];

学科分类号：

0829 ; 0907 ;

摘要：

通过对不同提取方法获得的海南木莲DNA质量进行分析,发现采用预先去杂CTAB法提取的海南木莲DNA比其它方法简便、高效,DNA杂质少,得率高;然后通过单因素实验设计对海南木莲ISSR—PCR反应体系进行优化,确立了适于海南木莲的ISSR反应体系,即20μL反应体系中含40 ng模板DNA、0.15 mmol.L-1dNTPs、0.40μmol.L-1引物、2.5 mmol.L-1Mg2+和1.5 UTaqDNA聚合酶;最后用16个海南木莲样品对优化体系进行检验,结果表明该体系扩增效果稳定,特异性高,可以用于海南木莲分子生物学的进一步研究。

引用

页码：91 / 96

页数：6

共 17 条

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