松果菊苷通过调节Nrf2表达减轻H2O2致心肌细胞损伤的实验研究

目的观察松果菊苷（ECH）对过氧化氢（H2O2）所致心肌细胞H9c2损伤的保护作用并探讨其机制。方法体外培养H9c2细胞系,采用MTT法检测H2O2对细胞存活率的影响,筛选最适作用浓度。将细胞分为5组,空白对照组、H2O2模型组（300μmol/L）、松果菊苷低剂量组（5 mg/L）、中剂量组（10 mg/L）、高剂量组（20 mg/L）。采用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位（MMP）;采用试剂盒检测培养基心肌激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）及丙二醛（MDA）释放量;采用蛋白免疫印记（WB）检测细胞质、细胞核中Nrf2蛋白表达水平。采用Nrf2抑制剂鸦胆苦醇预处理心肌细胞,检测细胞凋亡率和线粒体膜电位。结果 H2O2最适作用浓度为300μmol/L。与空白对照组相比,H2O2模型组心肌细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,MMP显著降低（P<0.05）;与H2O2模型组比较,松果菊苷处理组心肌细胞凋亡率明显下降（P<0.05）,MMP显著升高（P<0.05）。与空白对照组相比,H2O2模型组CK、LDH和MDA释放率明显升高（P<0.05）;松果菊苷处理后CK、LDH和MDA释放率显著降低（P<0.05）。与空白对照组相比,H2O2模型组Nrf2蛋白核转移水平增加（P<0.05）,与H2O2模型组比较,松果菊苷处理组Nrf2蛋白核转移水平进一步显著增加（P<0.05）。与松果菊苷处理组比较,鸦胆苦醇处理组心肌细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,MMP显著降低（P<0.05）。结论松果菊苷可以减轻H2O2对心肌细胞造成的损伤,推测其机制是通过促进Nrf2蛋白核移位激活Nrf2通路实现的。