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腺病毒载体携带凋亡素基因对人胃癌细胞的致凋亡作用
被引：2
作者：
徐伟锋
朱惠明
宋洋
王娜
蔡筱彦
王立生
机构：
[1] 暨南大学第二附属医院
来源：
关键词：
凋亡素基因;
腺病毒;
胃癌细胞;
D O I：
10.13820/j.cnki.gdyx.2008.01.071
中图分类号：
R735.2 [胃肿瘤];
学科分类号：
100214 ;
摘要：
目的探讨带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的重组腺病毒载体介导的凋亡素(VP3)基因对人胃癌细胞的致凋亡作用。方法在HEK293细胞中包装Ad-EGFP-VP3和Ad-EGFP两种腺病毒,大量扩增,并测定两种腺病毒滴度。以MOI=20感染人胃癌细胞,12,24,48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用Hoechst33258试剂盒染色,观察凋亡形态学改变。24h后用RT-PCR检测VP3基因的表达。6,12,24,48,72h后用FCM检测胃癌细胞的凋亡率。结果Ad-EGFP-VP3滴度为2.4×108pfu/ml,Ad-EGFP滴度为2.1×108pfu/ml。Hoechst33528染色显示Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞出现凋亡形态学改变。RT-PCR检测仅有Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞表达VP3基因的mRNA。FCM检测Ad-EGFP-VP3感染人胃癌细胞12h后凋亡率达51.7%。结论带有EGFP标记的重组腺病毒载体介导VP3基因导入胃癌细胞后,能有效诱导胃癌细胞凋亡。
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