密骨胶囊对骨Ⅰ型胶原代谢影响的实验研究

目的:运用去卵巢大鼠骨丢失动物模型,观察密骨胶囊对骨内Ⅰ型胶原代谢的影响。方法:3月龄清洁级健康雌性Wistar大鼠110只,体质量(120±10)g,采用卵巢切除动物模型,造模后将大鼠随机分为假切组、模型组和密骨胶囊组,分别于给药4周、8周、12周处死大鼠。运用酶联免疫吸附法检测尿脱氧吡啶啉(DPD)、吡啶啉(PYD);运用蛋白印迹免疫法检测骨内Ⅰ型胶原蛋白的表达,运用实时荧光定量聚合酶链式反应检测骨内COLIα1和COLIα2基因的表达及赖氨酸羟化酶2b(LH2b)基因表达。结果:药物干预4周后各组尿PYD/DPD比值比较未见明显差异;而药物干预8周后,模型组尿PYD/DPD比值减小,密骨胶囊组未见明显变化,且与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠去卵巢造模成功后,模型组骨内Ⅰ型胶原蛋白的表达处于低水平,与假切组比较差异有统计学意义(P<0.05);药物干预4周、8周和12周后,模型组骨内Ⅰ型胶原蛋白表达始终较低,而密骨胶囊组的Ⅰ型胶原蛋白在上述三个时间点的表达均较模型组高,且差异有统计学意义(P<0.05)。实时PCR结果提示,模型组骨内COL1α1mRNA和COL1α2mRNA的表达明显降低,与假切组比较差异有统计学意义(P<0.05).干预12周后,密骨胶囊组骨内COL1α1mRNA和COL1α2mRNA表达均明显升高,且均与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。去卵巢后大鼠骨内LH2bmRNA表达异常升高,且与假切组比较差异有统计学意义(P<0.05);密骨胶囊干预后,大鼠显示出降低因去卵巢引起LH2bmRNA表达异常增高的作用,且与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:密骨胶囊能上调骨内Ⅰ型胶原的表达,并且通过恢复去卵巢后LH2b异常表达改善Ⅰ型胶原代谢,进而改善骨基质结构。