中国兰SRAP-PCR体系的建立及优化

被引:11
作者
叶兰香 [1 ]
蒋彧 [2 ]
李萍 [1 ]
王海娥 [2 ]
何俊蓉 [2 ]
刘菲 [1 ]
卓碧萍 [2 ]
袁宁 [2 ]
机构
[1] 西南交通大学
[2] 四川省农业科学院园艺所
关键词
国兰; SRAP-PCR; 正交设计; 反应体系;
D O I
暂无
中图分类号
S682.31 [兰科植物];
学科分类号
090711 [园林植物与观赏园艺学];
摘要
序列相关扩增多态性(SRAP)是新一代的分子标记技术,尚未在兰花中应用过。本实验运用改进了的CTAB法提取国兰总DNA,并L16(45)正交设计,对影响中国兰PCR反应的4个因素(引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、扩增模版)在4个水平上进行优化试验,结果采用DPS软件分析。结果表明,在25μl总体积中,Taq酶为1个单位的情况下,中国兰SRAP-PCR反应最佳扩增体系为:Mg2+2 mmol.L-1、DNA模版100μg、dNTPs 0.25 mmol.L-1、引物0.3μmol.L-1。这一优化的SRAP-PCR体系的建立为后续国兰SRAP分析奠定基础。
引用
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页码:1648 / 1651
页数:4
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