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中国兰SRAP-PCR体系的建立及优化
被引:11
作者
:
叶兰香
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机构:
西南交通大学
西南交通大学
叶兰香
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袁宁
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机构
:
[1]
西南交通大学
[2]
四川省农业科学院园艺所
来源
:
西南农业学报
|
2010年
/ 23卷
/ 05期
关键词
:
国兰;
SRAP-PCR;
正交设计;
反应体系;
D O I
:
暂无
中图分类号
:
S682.31 [兰科植物];
学科分类号
:
090711
[园林植物与观赏园艺学]
;
摘要
:
序列相关扩增多态性(SRAP)是新一代的分子标记技术,尚未在兰花中应用过。本实验运用改进了的CTAB法提取国兰总DNA,并L16(45)正交设计,对影响中国兰PCR反应的4个因素(引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、扩增模版)在4个水平上进行优化试验,结果采用DPS软件分析。结果表明,在25μl总体积中,Taq酶为1个单位的情况下,中国兰SRAP-PCR反应最佳扩增体系为:Mg2+2 mmol.L-1、DNA模版100μg、dNTPs 0.25 mmol.L-1、引物0.3μmol.L-1。这一优化的SRAP-PCR体系的建立为后续国兰SRAP分析奠定基础。
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