黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞(英文)

背景:体外培养扩增的骨髓间充质干细胞可诱导分化为神经细胞,但是有些诱导剂有一定的毒性,不能应用于人体内。目的:以黄芪为诱导剂,诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞。设计、时间及地点:随机对照实验,于2002-01/2005-01在大理学院基础医学院的云南省重点实验室和四川大学基础医学院与法医学院的干细胞研究中心完成。材料:6周龄健康SD大鼠,体质量120～130 g。方法:以密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离培养骨髓间充质干细胞,并传代扩增。采含体积分数为0.125的黄芪无血清L-DMEM培养液诱导分化为神经样细胞,观察细胞形态变化,以免疫组织化学染色方法检测分化细胞中巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白的表达。主要观察指标:①诱导分化细胞的免疫组织化学鉴定。②RT-PCR方法半定量分析相关基因Ngn-1和Wnt-1基因在诱导过程中的表达。结果:经传代后,骨髓间充质干细胞呈纤维细胞样,有较强的增殖能力。经黄芪诱导后,细胞形态发生改变,巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶及胶质纤维酸性蛋白均阳性。Ngn-1和Wnt-1基因在黄芪诱导骨髓间充质干细胞过程中表达量升高。结论:骨髓间充质干细胞在黄芪诱导下可向神经样细胞分化。Ngn-1和Wnt-1基因在其分化过程中起正调控作用。