LAMP技术检测食品中转基因成分CaMV35S启动子的研究

被引:7
作者
肖维威 [1 ]
周琳华 [1 ]
吴永彬 [1 ]
蔡翠霞 [1 ]
马文丽 [1 ]
刘唐书 [2 ]
机构
[1] 南方医科大学基因工程研究所
[2] 广东省产品质量监督检验研究院
关键词
花椰菜花叶病毒; 环介导等温扩增技术; 转基因食品;
D O I
10.16429/j.1009-7848.2013.04.033
中图分类号
TS207.3 [食品分析与检验];
学科分类号
摘要
目的:建立一种快速检测CaMV35S启动子基因的环介导等温扩增技术检测方法。方法:针对CaMV35S启动子设计4对特异性引物,在链置换酶(Bst酶)作用下,65℃扩增1h。通过对转基因大豆GTS40-3-2等8种转基因标准品的检测,对该方法进行特异性评价。以F3、B3为引物,转基因大豆GTS40-3-2为模板,纯化后的PCR扩增产物与pMD-18T载体连接,构建含有CaMV35s启动子的质粒标准分子。配制7个浓度梯度的标准质粒分子,进行灵敏度分析。同时应用该方法和荧光PCR方法检测35种农产品及其加工品。结果:该方法特异性强,结果可视,检测灵敏度达200copies/μL,35种样品的检测结果与SYBRGreen荧光PCR检测结果一致。结论:建立的LAMP法具有快速,简单,可视化,灵敏度高和特异性强等优点,可应用于转基因产品的初步筛选。
引用
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页数:7
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