扩增内标在沙门氏菌PCR检测方法中的应用

被引：31

作者：

刘斌

史贤明

机构：

[1] 上海交通大学食品科学与工程系陆伯勋食品安全研究中心

来源：

微生物学通报 | 2006年 / 02期

基金：

美国农业部;

关键词：

扩增内标; PCR检测; 沙门氏菌;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2006.02.034

中图分类号：

TS207.7 [食品质量控制与保证];

学科分类号：

摘要：

在PCR反应体系中添加了一条人工构建的扩增内标片段,以指示沙门氏菌PCR快速检测中出现的假阴性。对9株沙门氏菌和15株非沙门氏菌进行PCR检测,结果显示所有沙门氏菌都能扩增到一条invA基因中的374bp特异性片段,而模板来源于非沙门氏菌时则只能扩增到一条513bp扩增内标片段。灵敏度试验显示,该PCR检测体系对猪霍乱沙门氏菌纯DNA模板的检测灵敏度为12·8fg/μL,如果将增菌时间确定为8h,则该检测体系对人工染菌牛乳中沙门氏菌的检测灵敏度可以达到起始浓度为8cfu/25mL。采用上述方法检测了80份污染严重的样品,证实此方法可以有效地排除假阴性,提高检测准确率。

引用

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