番茄子叶总蛋白双向电泳体系的建立

被引：31

作者：

黎飞 ^{[1
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徐秋芳 ^{[1
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臧宪朋 ^{[1
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赖亿玉 ^{[1
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程维舜 ^{[1
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徐幼平 ^{[2
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蔡新忠 ^{[1
]}

机构：

[1] 浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所

[2] 浙江大学分析测试中心

来源：

园艺学报 | 2010年 / 37卷 / 04期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

番茄; 双向电泳; 条件优化; 子叶; 蛋白质;

D O I：

10.16420/j.issn.0513-353x.2010.04.009

中图分类号：

S641.2 [番茄（西红柿）];

学科分类号：

090202 ;

摘要：

通过对IPG胶条梯度、上样方式、上样量、聚焦条件等4方面条件的优化,建立了番茄子叶总蛋白双向电泳体系,即采用TCA丙酮沉淀法提取番茄子叶总蛋白,选用24cmpH3-7NL的IPG胶条,采用水化上样,上样量300μg,按聚焦程序Ⅰ或Ⅱ聚焦后进行双向电泳分离和银染染色。若采用制备胶,以获取高含量蛋白点,则将上样量提高至1.5mg,按聚焦程序Ⅲ进行聚焦后进行双向分离,并采用胶体考马斯亮蓝染色。采用该优化的体系可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。

引用

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页数：8