肿瘤放射线诱导性TNF基因疗法的实验研究

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对机体具有一定的放射线保护作用，并能增强肿瘤的放疗效果。用可被放射线转录激活的Ｅｇｒ－１启动子与人ＴＮＦ的融合基因，构建成放射线诱导性的人ＴＮＦ双拷贝逆转录病毒载体ｐＥＴＤＣ，经包装细胞Ｐｓｉ－２和Ｃｒｉｐ的两次包装后，其病毒上清的病毒滴度达４×１０５ＣＦＵ／ｍｌ。用此病毒上清感染小鼠成纤维细胞株ＮＩＨ３Ｔ３和黑色素细胞株Ｂ１６．Ｆ１０，经Ｇ４１８抗性筛选后，得到的阳性克隆分泌ＴＮＦ量分别为２．１ｎｇ／ｍｌ和１．１ｎｇ／ｍｌ，并经ＲＴ－ＰＣＲ证实了人ＴＮＦｍＲＮＡ的表达。经２０Ｇｙ的放射线体外照射后，其ＴＮＦ表达量分别升至１３．８ｎｇ／ｍｌ和５．７ｎｇ／ｍｌ，即分别为照射前的５．６倍和４．２倍。此结果为其将来瘤体内注射该ＴＮＦ基因表达载体并辅助局部放疗的体内实验打下了基础。