溶藻弧菌脂多糖单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

用细菌颗粒性抗原多次免疫Balb/c小鼠 ,首次制备了一株鱼类病原溶藻弧菌VAF0 1的LPS的单克隆抗体 4D5。 4D5识别VAF0 1和VAF0 2 (另一株病原溶藻弧菌 )的LPS的核心多糖抗原。除了与测试的溶藻弧菌发生免疫识别外 ,4D5还与解蛋白弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌和海藻施万氏菌发生免疫交叉反应 ,但不与副溶血弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌等发生交叉反应。用温和高碘酸氧化法对LPS处理后 ,VAF0 1的LPS不再与 4D5识别 ,VAF0 2的LPS与 4D5的反应部分减弱 ,推测VAF0 1及VAF0 2的LPS有不同的组分和结构。用抑制ELISA法半定量检测溶藻弧菌培养上清的LPS ,测得培养4 8小时LPS释放量不超过 5 7μg/ml,大大低于使鱼类致死所需的LPS的剂量。