反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株耐药性的实验研究

目的采用一段人工合成的互补于多药耐药基因（ｍｄｒ１基因）的反义硫代磷酸寡核苷酸（ＡＳ ＳＯＤＮ，反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ（耐阿霉素的Ｋ５６２细胞株），来逆转白血病细胞的多药耐药。方法四唑蓝快速比色法（ＭＴＴ法）检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的半数抑制量（ＩＣ５０），流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，逆转录聚合酶链反应（ＲＴ ＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１与β２微球蛋白之比，ｍｄｒ１／β２ ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ／Ｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５７２ｍｇ／Ｌ降至处理后的６９７ｍｇ／Ｌ，相对逆转效率为７３０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加。Ｐ１７０表达阳性率从处理前的（９８２６±１３５）％降至处理后的（１８３±６５）％，ｍｄｒ１／β２ ＭＧ亦由处理前的２０７±０１６降至１５７±０１４，ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。