肝素促进转化生长因子-β在体外诱导兔牙髓干细胞成骨向分化中的作用

被引:9
作者
麦麦提依明·哈力克
木合塔尔·霍加
刘晓文
帕尔哈提·阿布都热合曼
机构
[1] 新疆维吾尔自治区人民医院口腔科
关键词
牙髓干细胞; 转化生长因子-β3; 肝素; 成骨向分化; 兔;
D O I
暂无
中图分类号
R781 [口腔内科学];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3联合肝素在体外诱导兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨向分化中的能力。方法新西兰幼兔4只,采用酶解组织块法分离培养兔DPSCs,传代培养至第3代兔DPSCs,分为空白对照组、TGF-β3组和TGF-β3+肝素组;空白对照组正常培养,TGF-β3组在细胞培养基中加入20μg/L TGF-β3,TGF-β3+肝素组在细胞培养基中同时加入20μg/L TGF-β3和5u/mL肝素。采用碱性磷酸酶(alkailine phosphate,ALP)试剂盒检测各组兔DPSCs成骨向诱导后第7、14天细胞内ALP活性,细胞爬片采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物RUNT相关转录因子2(runt related transcription factor 2,RUNX-2)和骨钙素(osteocalcin,OC)表达情况,采用茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果兔DPSCs在诱导体系中生长状态良好;TGF-β3+肝素组第7、14天ALP活性[(27.20±1.01)、(29.06±1.39)u/(mg·pro)]高于TGF-β3组[(12.69±1.03)、(9.44±1.05)u/(mg·pro)]和对照组[(5.96±3.68)、(6.10±3.66)u/(mg·pro)](P<0.01),TGF-β3组高于对照组(P<0.01);TGF-β3组和TGF-β3+肝素组成骨诱导第7天RUNX-2开始出现阳性表达,第14天OC有阳性表达,对照组均为阴性;第21天茜素红染色对照组为阴性,TGF-β3组为阳性,TGF-β3+肝素组为强阳性。结论肝素有促进TGF-β3体外诱导兔DPSCs成骨向分化的能力。
引用
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