牛BLG基因5'调控成分的克隆和制备乳腺生物反应器研究

被引:24
作者
杨国庆
戴蕴平
朱宝利
陈永福
齐顺章
机构
[1] 中国农业大学生物学院动物生化教研室 北京 100094
[2] 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
[3] 中国农业大学生物学院动物生化教研室
关键词
牛BLG基因调控序列; hGH基因; 原代山羊乳腺上皮细胞; 暂时表达; 转基因小鼠;
D O I
暂无
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
用PCR法克隆了牛β-乳球蛋白(BLG)基因的 1个片段,它包括 650 bp的 5’侧翼序列,第一二外显子和第一内含子.以该片段中的 650 bP的侧翼序列及转录起始位点下游 11 bP的非编码区(共 661 bP)作为调控序列,与人生长激素(hGH)基因构建成了表达载体,在培养的原代山羊乳腺上皮细胞中进行暂时表达,结果在激素诱导下, hGH基因能够表达,并且表达产物的绝大部分分泌到培养基中.将上述表达载体中的BLG/hGH融合基因部分经显微注射法制得5只转基因阳性小鼠,其中1只小鼠乳清中hGH的含量为420 μg/mL而血清中仅为0.051μg/mL,说明本实验克隆的牛BLG基因5’调控序列可以控制目的基因在转基因动物中表达,基本上具有乳腺特异性,而且产物能分泌至乳汁中.
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