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人肌肌酸激酶胍变性时的失活与构象变化的比较研究
被引:2
作者:
李颖
侯立向
王希成
周海梦
机构:
[1] 清华大学生物科学与技术系,中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室北京,北京
来源:
关键词:
人肌肌酸激酶;
胍变性;
构象;
活性;
D O I:
暂无
中图分类号:
学科分类号:
摘要:
应用二阶导数光谱、紫外差吸收光谱和荧光光谱等监测手段,研究了人肌肌酸激酶在盐酸胍溶液中的构象变化。二阶导数光谱结果表明,若以6M盐酸胍中肌酸激酶酪氨酸残基的暴露程度为100%,则天然酶酪氨酸残基的暴露程度只有2%。而紫外差吸收光谱和荧光光谱的变化与兔肌肌酸激酶的结果相似。比较不同胍浓度下人肌肌酸激酶的失活与构象变化,表明酶的失活先于构象变化。同时还测定了不同浓度胍溶液中人肌酶的失活与构象变化的速度常数。结果表明以几种方法测定的构象变化均为单相的一级过程,而酶的失活却呈现了由快慢两相组成的一级反应过程。比较同浓度胍溶液中的失活速度与构象变化速度,发现酶失活的快相反应速度常数比构象变化的速度常数大1—2个数量级,慢相速度常数与构象变化速度常数相近。上述结果进一步支持了酶的活性部位构象柔性的观点。
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