薄皮甜瓜果实ACC合成酶cDNA克隆及反义表达载体的构建

被引：4

作者：

郭庆勋 ^{[1
]}

秦智伟 ^{[1
]}

丁国华 ^{[1
]}

李景鹏 ^{[2
]}

机构：

[1] 东北农业大学园艺学院

[2] 东北农业大学生命科学学院

来源：

东北农业大学学报 | 2006年 / 01期

关键词：

薄皮甜瓜; ACC合成酶基因; 反义基因; 反义表达载体;

D O I：

10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2006.01.006

中图分类号：

S652 [甜瓜];

学科分类号：

090201 ;

摘要：

从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7 kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与Gen-Bank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase,ACS)基因比对,核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性为98%。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pCAM2301的E8启动子和NOS终止子之间,构建成E8调控下ACS基因反义表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。

引用

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共 6 条

[1] 甜瓜采后生理和贮藏保鲜研究进展 [J].