外源性双链RNA对小鼠卵母细胞basonuclin基因表达的影响

被引：6

作者：

马峻

周红林

苏雷

季维智

机构：

[1] 中国科学院昆明动物研究所,中国科学院昆明动物研究所,中国科学院昆明动物研究所,中国科学院昆明动物研究所昆明　,昆明　,昆明　,昆明

来源：

中国科学(C辑:生命科学) | 2002年 / 03期

关键词：

RNAi; dsRNA; basonuclin; 卵母细胞; 基因功能;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

在植物及低等动物线虫中,引入外源性双链RNA（dsRNA）会导致细胞中同源mRNA降解,从而干扰其内源基因的表达,这可能是有机体防范病毒或转座子诱导DNA突变的一种生理机制,称为RNA干涉（RNA interference,RNAi）.利用RNAi研究basonuclin基因在卵母细胞发生过程中的功能.将basonuclin特异的dsRNA导入小鼠生发泡期卵母细胞,可有效降低其mRNA的丰度,这种降解作用与dsRNA的浓度及作用时间成正比,但不影响非同源基因的表达,证明basonuclin dsRNA能特异识别、降解其内源基因的转录产物.免疫组化实验显示,dsRNA能降低卵母细胞中basonuclin蛋白的水平,但其效率不如RNAi对tPA及cMos基因活性的抑制,这可能是由于basonuclin蛋白的半衰期较长,而生发泡期卵母细胞在体外存活时间较短.结果表明,dsRNA能阻抑卵母细胞中同源基因的表达,其作用相当于基因敲除.质粒表达的发夹环型dsRNA也可以有效降解basonuclin转录产物,这为研究basonuclin在卵母细胞发育早期的功能提供了新的手段.

引用

页码：248 / 255+291 +291

页数：9