差速贴壁联合应用5-BrdU对心肌细胞纯度及活力的影响

被引:17
作者
郎明健 [1 ,2 ]
郭敏 [1 ]
曾秋棠 [1 ]
闵新文 [2 ]
杨汉东 [2 ]
机构
[1] 华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科
[2] 郧阳医学院附属东风医院心内科
基金
湖北省教育厅重点项目;
关键词
心肌细胞; 纯化; 差速贴壁技术; 5-溴脱氧尿苷;
D O I
10.13191/j.chj.2008.05.60.langmj.006
中图分类号
R329.2 [人体细胞学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的研究多次差速贴壁并联合应用5-溴脱氧尿苷(5-B rdU)对分离的心肌细胞纯度及活性的影响。方法以酶消化法分离乳鼠心肌细胞,分别进行1~3次差速贴壁并联用或不联用5-B rdU以纯化心肌细胞。正常培养3 d后,观察细胞的形态特征。用流式细胞技术分析各实验组心肌细胞的纯度。以台盼蓝染色、MTT比色法及细胞线粒体内膜功能检测(流式细胞术)来反映各实验组心肌细胞的活性。结果随着差速贴壁次数的增加,心肌细胞得以纯化,但细胞的活性有所下降。联用5-B rdU后细胞纯度进一步提高,且对细胞的活性无明显影响;其中两次差速贴壁并联合应用5-B rdU后,可获得纯度高、活性好的心肌细胞。结论两次差速贴壁并联合应用5-B rdU为纯化心肌细胞的有效方法。
引用
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