探讨了对碘苯酚(PIP)增强的鲁米诺—过氧化氢—辣很过氧化物酶(Luminol-H2O2-HRP)体系的反应特性,通过正交试验并经方差分析,获得了增强发光酶免疫检测法测定辣根过氧化物酶(HRP)及其标记物的最佳实验条件(缓冲液的pH=8.2,Luminol的浓度5×10-4mol/L,H2O2的浓度4×10-3mol/L,PIP的浓度4×10-4mol/L,乙二胺四乙酸的浓度0.25mg/ml,温度25℃.反应时间10min)。在上述最佳条件下检测HRP的浓度,其线性范围为:10-9~10-12g/L,Y=-0.05+1.07X(r=0.96,P<0.01),最低检出限为 0.2pg(5 amol)。