6His-VP3融合蛋白的表达、纯化及其捕获细胞中相关蛋白的初步探讨

被引：1

作者：

王阿慧

孙军

毕昊

彭冬君

田俊

狄勇

宗义强

屈伸

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系

来源：

医学分子生物学杂志 | 2007年 / 02期

关键词：

凋亡素; VP3融合蛋白; 相关蛋白; 肿瘤特异性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的研究人肝癌细胞HepG2与人胎肝细胞L-02中与VP3蛋白相互作用的蛋白组分,以探讨VP3特异性诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用PCR方法克隆vp3的DNA片段,将其插入质粒pET-28a(+)构建含6个组氨酸标签6His-VP3融合蛋白的原核表达载体。利用亲和层析技术制备纯化的6His-VP3融合蛋白作为诱饵,分别从肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02的总蛋白中,通过pull-down技术捕获与VP3相互作用的特异性蛋白质组分。结果获得了高纯度的6His-VP3融合蛋白;以其作为诱饵从HepG2细胞和L-02细胞中捕获到的与VP3作用的相关蛋白质组分存在差异。结论肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02中,与VP3作用蛋白的差异与其在不同细胞中的生物学行为相对应。

引用

页码：112 / 115

页数：4

共 3 条

[1]

凋亡素:一种诱导肿瘤特异性细胞凋亡的病毒蛋白[J]. 章应慧,屈伸,Mathieu H.M.Noteborn.医学分子生物学杂志. 2004(02)

[2] The viral death effector Apoptin reveals tumor-specific processes [J].

Rohn, JL ;

Noteborn, MHM .

APOPTOSIS, 2004, 9 (03) :315-322

[3]

Cloning of chicken anemia virus vp3 gene and apoptosis inductive effect of vp3 gene in vitro[J] . Sun Jun,Wang Yuzhe,Zong Yiqiang,Qu Shen.Journal of Huazhong University of Science and Technology[Medical Sciences] . 2003 (4)

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