腺病毒E1A基因高效真核表达载体的构建与鉴定

目的构建真核高效表达该基因的载体，为进一步探讨运用高效表达Ｅ１Ａ的重组质粒进行肿瘤基因治疗及研究Ｅ１Ａ基因的作用机理和与其他基因的相互作用提供方法。方法运用分子克隆技术构建２套用较强启动子驱动的表达Ｅ１Ａ的真核重组质粒，并用多种限制性内切酶和ＤＮＡ测序对重组质粒进行鉴定。结果构建的重组质粒分别含有１．３４ｋｂ和１．７７ｋｂＥ１Ａ片段，分别命名为ｐＥ１Ａ １和ｐＥ１Ａ ２，且插入的方向均为正向，无重排等异常现象，核苷酸序列无误。结论为人腺病毒５型（Ａｄ５）Ｅ１Ａ基因实验性抗肿瘤基因治疗包括放射增敏研究提供方法学及资料。