钩端螺旋体属特异性耐热抗原(TR-Ag)免疫家兔后,家兔血清显微镜凝集试验(MAT)和玻片凝集试验(SAT)出现阳性的时间有明显差异。动物免疫后第3天即可出现SAT阳性,第7~10天达高峰,2周后转为阴性。MAT效价在免疫后2周达高峰,4周后开始下降。提取免疫后7~10天家兔血清IgG、IgM及IgA进行MAT和SAT检测,IgM的MAT效价明显高于IgG,IgA则为阴性,而SAT结果仅IgM为阳性。ELISA夹心法的检测结果也与MAT和SAT一致,表明SAT检出的TR-Ag抗体为IgM,提示应用TR-Ag检测病人相应抗体时应采用早期血清。